紫外殺菌在潔凈工作臺(tái)中材料與方法

研究者們對(duì)潔凈工作臺(tái)無(wú)菌操作空間環(huán)境的要求越來(lái)越高，采用單純的紫外殺菌時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng).借助無(wú)毒無(wú)害的化學(xué)殺菌劑輔助紫外殺菌將會(huì)有效地縮短殺菌時(shí)間，潔凈工作臺(tái)的利用更高效，同時(shí)也可延長(zhǎng)紫外燈的使用壽命.

1.1 原料實(shí)驗(yàn)室自制果汁，并在室溫下開蓋放置 36 h，果汁與空氣直接接觸，使果汁在自然環(huán)境條件下污染一定濃度的雜菌.

1.2 培養(yǎng)基普通營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基：胰蛋白胨 5 g，酵母浸粉 2.5 g，葡萄糖 1.0 g，瓊脂粉 15.0 g，pH 值 7.0，去離子水1 000 mL，121 ℃滅菌 30 min.

1.3 主要儀器與設(shè)備YXQ-LS-70A 型高壓滅菌鍋（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；BGZ-240 型烘干箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；SW-CJ-2D 型潔凈工作臺(tái)（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；SPX-150B-Z型生化培養(yǎng)箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）.

1.4 含菌培養(yǎng)皿的準(zhǔn)備本文采用直徑為 9 cm 的培養(yǎng)皿（表面積為 3.14×4.52=63.585 cm2），按照平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定自制果汁中細(xì)菌污染情況，重復(fù) 3 次，取平均值.然后吸取自制飲料 1.0 mL 均勻涂布至普通培養(yǎng)基上，涂布后的含菌培養(yǎng)基上細(xì)菌分布密度可由公式（1）計(jì)算得到.含培養(yǎng)基上細(xì)菌分布密度（CFU?cm-2） = 自制果汁中細(xì)菌總數(shù)（CFU?mL-1）培養(yǎng)皿表面積（cm2）

1.5 潔凈工作臺(tái)乙醇輔助紫外殺菌效果的確定將 21 個(gè)含菌培養(yǎng)基分為 7 組，分別置于潔凈工作臺(tái)（操作空間為 1150×500×500 mm）中，將培養(yǎng)皿蓋打開，然后開啟紫外燈（40 W）照射 30 min，每隔 5 min 取出 1 組培養(yǎng)皿.潔凈工作臺(tái)中均勻噴入 10 mL 75%乙醇溶液，然后按照上述方法將開蓋的含菌培養(yǎng)基置于潔凈工作臺(tái)中紫外燈照射 30 min，未經(jīng)紫外線照射的作為陰性對(duì)照，取出的培養(yǎng)皿于 37 ℃條件下培養(yǎng) 24 h，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)，取 3 次重復(fù)的平均值.1.6 潔凈工作臺(tái)無(wú)菌環(huán)境維持時(shí)間的確定將開蓋的含菌培養(yǎng)基置于潔凈工作臺(tái)中，采用乙醇輔助紫外線照射 25 min，然后將紫外燈關(guān)閉，培養(yǎng)皿繼續(xù)置于潔凈工作臺(tái)中 48 h，每隔 12 h 取出 1 組培養(yǎng)皿，置于 37 ℃下培養(yǎng) 24 h，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，每組 3個(gè)重復(fù)，取平均值.